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离心机及其转子的种类,你了解多少

导语:离心机是生物学实验中必不可少的仪器,看似通用的仪器,却是有许多学问的,实验操作中我们需要了解离心机知识,能够合理利用它而更稳定地为我们的实验服务。

离心机是生物学实验中必不可少的仪器,看似通用的仪器,却是有许多学问的,实验操作中我们需要了解离心机知识,能够合理利用它而更稳定地为我们的实验服务。

离心机作为一种实验室通用仪器,几乎每个实验室都会配置一到两台甚至数台。大家对其并不陌生,我们整理了一些关于离心机及其转子种类的资料分享给大家。

 

一、离心技术的基本原理

1、离心力(force, F

F = m * a = m * ω2r2

a:粒子旋转的加速度

m:粒子的有效质量,g为单位

ω:粒子旋转的角速度,弧度/s为单位

r:粒子的旋转半径,cm为单位

2、相对离心力(relative centrifuge force, RCF

通常离心力常用地球引力(g)的倍数来表示,因而称为相对离心力(RCF)。常用数字×g来表示,例如13000g表示相对离心力为13000。相对离心力指在离心场中,作用与颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度g(980cm/s2)。

RCF = ma/mg = mω2r2/mg = ω2r2/g

∵ω = 2π× (rpm)/60

RCF = 1.119 × 10-5 × rpm2r

rpm:revolutions per minute为每分钟转数

由上式可知,只要给出旋转半径r,则RCF和rpm之间可以相互换算。

由于转头的形状及结构的差异,每台离心机的离心管从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一样的,所以在计算时规定旋转半径均用平均半径rav代替,即最大半径rmax和最小半径rmin的平均值。

一般,低速离心时常以转速rpm来表示,高速离心时则以g表示。报告离心条件时使用RCF比rpm要科学,因为它可以真实地反映颗粒在离心管内不同位置的离心力及其动态变化。

 WIGGENS离心机均有RPMRCF双显示功能,操作者可以一目了然的看到转速和离心力。

 

二、离心机的种类

离心机按用途分为工业用离心机实验用离心机。后者根据功能又分为制备性离心机和分析性离心机。制备性离心机一般用来分离各种生物材料,分离的样品量比较大,也是大多数科研实验室配备的离心机种类。分析性离心机常用来研究纯的生物大分子和颗粒的理化性质,一般有光学系统,可监测粒子在离心场中的行为,能推断物质的纯度、形状和分子量等,且都是超速离心机。此处和大家分享下几种实验室常用的制备性离心机。

制备性离心机根据转速可分为普通离心机、高速离心机、超速离心机等。具体如下:

1、普通离心机

最大转速6000rpm左右,最大RCF接近6000g,容量为几十毫升至几升,分离形式是固液沉降分离,其转速不能严格控制,通常不带冷冻系统,室温操作,用于收集易沉淀的大颗粒物质,如:细胞等。在细胞培养实验室常常能见到。

WIGGENSUNICEN21系列台式通用离心机,提供了九种可选转头,每种转头根据客户的具体应用不同,配以不同的适配器,可以解决您几乎所有的实验室通用性离心的需要。

2、高速离心机

转速为2000-25000rpm,最大RCF为89000×g,最大容量可达3L,一般都有制冷系统,以消除高速旋转转头与空气之间摩擦而产生的热量,离心室的温度可以调节和维持在0℃-4℃,可以严格准确的控制转速温度和时间,并有指针或数字显示。通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀和免疫沉淀物等的分离纯化工作,但不能有效地沉降病毒、小细胞器或单个分子。高速离心机是实验室中最常见的离心机类型,一般的分子实验室都会配备。

WIGGENSMICROCENBIOCEN系列高速离心机,是实验室高速,小量样品离心操作的理想选择。

 

3、超速离心机

转速可达50000-80000rpm,RCF最高可达510000×g,离心容量由几十毫升至2升,分离形式为差速沉降分离和密度梯度区带分离,需严格配平(误差<0.1g)。与高速离心机的主要区别是增加了真空系统。常用于分离亚细胞器、病毒、核酸、蛋白质和多糖等。超速离心机价格较高,一般只有大型实验室或公共平台才进行配备。 

三、离心机转子的种类

离心机的转子是其主要的工作部件,一台离心机的全套转子甚至比离心机主机还要贵。且转子的规格、品种的多少也是衡量离心机生产技术掌握程度的重要标志,常见的转子类型主要为固定角转子、水平转子。此外还有区带转子、连续流动转子、垂直转子等,这些类型的转子并不常用,我们在这里就不做介绍了。

1、固定角转子

离心管与转子的转轴之间有一定的角度,角度变化范围通常在14°-45°,如下图1。此种转子重心低,寿命长,容量较大,转速较高,能承受的最大离心力可达800000g。主要用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。颗粒在扇形溶液移动的距离很短,碰到外壁的颗粒沿着管壁滑到管底,形成沉淀,因此这种转子能很快地收集沉淀物。分离过程中,由于管壁的作用,在离心管内将会引起强烈的对流,对具有相同沉降速率的颗粒会产生不良影响,如图2。

2、水平转子

又称甩平转子、荡平转子。转头静止时,处于转头中的离心管中心线与旋转轴平行。转头旋转加速时,离心管中心线由平行位置逐渐过渡到垂直位置,即与旋转轴成90°角。此种转子主要用于样品做密度梯度离心。颗粒移动距离长,相应离心时间一般也较长,溶液中的组分相对于管壁的位置在离心过程中和离心后不发生改变,因此离心效果好,但因颗粒在离心场中是从旋转中沿径向散离出去,而不是按相互平行的路线沉降。颗粒碰到外壁沿着管壁滑到管底,因此也会产生对流,但比固定角转子小,如图4。低速启动或停机时会产生振动,影响分离效果。水平转子又分为敞开式和封闭式两种,一般制备容量大,转速小于10000rpm,离心力场在16000×g以内的,作为敞开式,主要用于样品的初分离。制备容量较前者小,转速大于10000rpm,离心力场在16000×g以上的,为了减少风力的影响,一般作为封闭式,主要用于线粒体、叶绿体、细胞核等的分离和密度梯度离心。此外,用于离心酶标板的转子也可归纳为水平转子,如下图3。

图3 几种常见的水平转子及其适配器

图4 水平转子颗粒离心过程示意图

WIGGENS在各型离心机中均配备完善的转子类型和各种适配器,保证了客户可以最大限度的实现了一机多用功能。

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